Publicação científica trimestral do CREMERJ - volume 3 - número 2 - 2024

50 Testes diagnósticos em doenças infecciosas Fernando S.V. Martins et al. Med. Ciên. e Arte , Rio de Janeiro, v.3, n.2, p.7-64, mai-ago 2024 a inclusão de antimicrobianos não impli- cados como alternativa terapêutica poderá ser desejável e necessária como comple- mento da identificação bacteriana e na vigilância do aparecimento e disseminação de resistência. Difusão em ágar A técnica de Kirby-Bauer (Figura 1) baseia-se na difusão de antimicrobiano contido em disco de papel de filtro aplicado sobre ágar previamente semeado com um inóculo padronizado do microrganismo a ser testado. À medida que a distância do disco aumenta, a concentração do an- timicrobiano difundido diminui logarit- micamente, até o limite (zona ou halo de inibição) em que é possível o crescimento da bactéria inoculada e em multiplicação no ágar, o que determina a concentração inibitória mínima (CIM) para o fármaco testado. A CIM estabelecida pelo limite do halo não é quantificada diretamente em µg/mL. Para isto, o diâmetro do halo de inibição é medido e comparado com tabelas previamente estabelecidas, o que permite verificar se o valor obtido corresponde a uma CIM dentro dos padrões em que se considera o antibiótico como eficaz para o tratamento de infecções causadas pelo microrganismo testado. O teste com o disco é realizado em ágar de Mueller-Hinton, para a maioria das bactérias de importância médica. Contudo, para as bactérias de crescimento exigente, recomenda-se o enriquecimento do meio com outros nutrientes. Para o S. pneumo- niae , por exemplo, o ágar de Mueller-Hin- ton deve ser suplementado com sangue desfibrinado de carneiro a 5%. O inóculo bacteriano deve ser preparado por suspen- são direta em salina de colônias obtidas de cultivo em ágar sangue, incubado por 18 a 24 horas, ajustando-se para a turbidez padrão de 0,5 McFarland. A leitura dos resultados é feita após incubação de 35°C por 20 a 24 horas. É possível definir no teste de difusão em ágar, através da comparação do diâme- tro da zona de inibição com as tabelas de referência, três diferentes categorias de resposta de um microrganismo a deter- minado antimicrobiano: “suscetível” (ou “sensível”), “intermediária” e “resistente”. Figura 1 Difusão em ágar: técnica de Kirby-Bauer Fonte: Public Health Image Library - CDC, 2013.