Publicação científica trimestral do CREMERJ - volume 3 - número 2 - 2024

46 Testes diagnósticos em doenças infecciosas Fernando S.V. Martins et al. Med. Ciên. e Arte , Rio de Janeiro, v.3, n.2, p.7-64, mai-ago 2024 Para superar a desvantagem inerente do custo da PCR e melhorar a capacidade diagnóstica em contextos sindrômicos, foi desenvolvida uma variante da PCR, cha- mada PCR multiplex, que permite a detec- ção simultânea de múltiplos alvos em uma única reação. A PCR multiplex tem maior abrangência de diagnóstico, menor tempo e custo quando comparada a realização de diferentes testes moleculares individuais concomitantes (https://www.ncbi.nlm.nih . gov/pmc/articles/PMC88949/). Diversos painéis de PCRmultiplex estão cada vez mais disponíveis em laboratórios clínicos, embora com custo ainda elevado. Estes painéis geralmente incluem os mi- crorganismos mais comumente associados a um diagnóstico sindrômico, como sepses, meningite/encefalite, infecção respiratória, infecção articular e diarreia. (57,58) Tecnologia molecular no cenário point-of-care A utilização de técnicas moleculares rápidas visando o diagnóstico imediato da etiologia de um processo infeccioso no pon- to de cuidado é relativamente recente, como ilustrado pela inclusão de testes rápidos de diagnóstico de tuberculose. Contudo, ainda que não amplamente disponíveis, os testes moleculares rápidos representam ferramentas estratégicas para otimização do cuidado na atenção primária, o que jus- tifica o crescente interesse e investimento no desenvolvimento de testes moleculares simples. A perspectiva é de que os desafios operacionais sejam resolvidos e os custos reduzam, possibilitando a progressiva apli- cação desses recursos na atenção primária. Ainda mais promissora é a possibilidade de tornar factível a abordagem diagnóstica molecular conjunta de múltiplos agentes de síndromes comuns. Sequenciamento de nova geração Diferentes tecnologias de sequencia- mento de nova geração (NGS, do inglês new generation sequencing ) foram dis- ponibilizadas para uso clínico, como o sequenciamento do genoma completo, o se- quenciamento direcionado (target – tNGS) e a metagenômica (mNGS). Sequenciamento do genoma completo No sequenciamento do genoma com- pleto (WGS, do inglês whole-genome se- quencing ), milhões de fragmentos de DNA microbiano são lidos em paralelo. Em se- quência, estas leituras são agrupadas de forma a reconstruir o genoma microbiano, possibilitando a identificação do patógeno. A técnica do WGS tem se revelado uma ferramenta valiosa e acurada na investi- gação e prevenção de surtos hospitalares, viabilizando a identificação precoce de um surto em potencial. Adicionalmente, abre novas perspectivas para o rastreio de determinantes genéticos de resistência antimicrobiana. (59)