Publicação científica trimestral do CREMERJ - volume 3 - número 2 - 2024

43 Med. Ciên. e Arte , Rio de Janeiro, v.3, n.2, p.7-64, mai-ago 2024 Testes diagnósticos em doenças infecciosas Fernando S.V. Martins et al. ditados pela gravidade do quadro. Nestas circunstâncias, é prudente que o paciente, quando não imune , fique sob observação, porque a evolução para formas graves pode ocorrer em poucas horas. Em casos de malária grave, ummicros- copista pouco experiente poderá confundir esquizontes de P. falciparum com o P. vivax. A despeito desse resultado, o médico não poderá cometer o mesmo equívoco que o técnico de laboratório, uma vez que malária grave deve ser sempre considerada e trata- da como sendo causada pelo P. falciparum até que seja comprovado o contrário. Pesquisa direta de antígenos por técnicas imunológicas Os métodos de detecção antigênica baseiam-se, em sua maioria, na reação de anticorpos específicos com o antígeno microbiano alvo em amostras clínicas. A relativa simplicidade dos métodos e a ra- pidez na obtenção de resultados (minutos) serviram de incentivo para o desenvolvi- mento e a disponibilização progressiva de diversas técnicas (aglutinação pelo látex, imunocromatografia, imunoensaio etc.) para detecção de antígenos de bactérias, fungos, vírus e protozoários (Quadro 10). Na pandemia de Covid-19, o desenvolvi- mento, a validação e a disponibilização de testes rápidos antigênicos foram fundamen- tais para acelerar o controle da pandemia, visto que a técnica padrão molecular nem sempre estava disponível para ser utilizada em larga escala. Os testes rápidos antigê- nicos, ao viabilizar diagnóstico precoce da infecção do SARS-CoV-2 no ponto de atendimento, permitem definir rapidamen- te as medidas pertinentes para reduzir a transmissão, como isolamento de casos e rastreio de contactantes. Métodos de caracterização molecular O notável avanço da engenharia ge- nética nos últimos 30 anos tem possibi- litado o desenvolvimento de técnicas em microbiologia com finalidades diagnóstica e epidemiológica. A tecnologia de ácidos nucleicos inclui sistemas de amplificação de DNA e RNA, sistemas de hibridização e de sequenciamento de DNA. É possível, através destas técnicas, identificar "sinais" da presença de agente infeccioso emmate- riais biológicos que nem sempre dependem de sua viabilidade, o que pode resultar em maior capacidade de detecção do que os métodos convencionais. (56) Os métodos moleculares receberam grande impulso com o desenvolvimento da técnica conhecida como PCR (do inglês, polymerase chain reaction ), descrita por Saiki et al. (1985). A PCR amplifica peque- nos e específicos segmentos do genoma, permitindo a obtenção, in vitro , de várias cópias de determinada região do DNA. Como a reação de PCR é específica, pode- -se obter a amplificação de sequências de nucleotídeos-alvo mesmo em uma amostra com grande diversidade de sequências,