Publicação científica trimestral do CREMERJ - volume 3 - número 2 - 2024
39 Med. Ciên. e Arte , Rio de Janeiro, v.3, n.2, p.7-64, mai-ago 2024 Testes diagnósticos em doenças infecciosas Fernando S.V. Martins et al. A técnica é simples, rápida e tem alta capacidade de resolução. Em linhas gerais, consiste em colocar uma gota (materiais líquidos como o LCR e a urina) ou preparar uma distensão (materiais espessos como pus e escarro) sobre lâmina limpa, deixar secar por alguns minutos em temperatura ambiente e proceder à coloração. Todo o procedimento não exige mais de 20 a 30 minutos. A bacterioscopia pelo Gram permite identificar presuntivamente uma bactéria dentro de um contexto clínico, através de suas características morfotintoriais pe- culiares. As diferenças tintoriais resul- tam fundamentalmente das diferenças na composição da parede celular bacteriana, conferindo capacidades distintas de reter o primeiro corante (violeta que confere co- loração roxo-azulada aos Gram-positivos), ou serem descoradas pelo álcool e a seguir coradas pelo corante de fundo (fucsina ou safranina que confere coloração averme- lhada aos Gram-negativos). A correta interpretação do Gram, en- tretanto, depende de uma análise criteriosa da correspondência entre o microrganismo compatível com as características morfo- tintoriais observadas, o material biológico examinado e o contexto clínico (ver Quadro 8). Assim, por exemplo, o mesmo achado de cocos Gram-positivos agrupados em cadeias obtidos de materiais biológicos de pacientes em contextos clínicos distintos (LCR de meningite neonatal e urina de pielone- frite) correspondeu a agentes infecciosos diferentes (respectivamente, Streptococcus agalactiae e Enterococcus faecalis ). A sensibilidade do Gram varia consi- deravelmente com o inóculo bacteriano presente no espécime. Na investigação de infecção urinária a sensibilidade é de 25%, quando estão presentes menos de 1.000 unidades formadoras de colônias (UFC) por mL, e de até 97% quando a quantida- de é superior a 100.000 UFC/mL. O uso prévio de antimicrobianos, com potencial de reduzir a população bacteriana, resulta frequentemente em diminuição da sensi- bilidade do teste. Nas meningoencefalites por S. pneumoniae , por exemplo, a sensi- bilidade do Gram de LCR é de cerca de 90% nos casos não previamente tratados com antibióticos e de cerca de 60%, nos casos em que o início da antibioticoterapia antecedeu a coleta de LCR. No intuito de propiciar maior rendi- mento do Gram em líquidos corporais ori- ginalmente estéreis (cefalorraquidiano, pleural, pericárdico, peritoneal, sinovial) é recomendável utilizar o sedimento do respectivo líquido biológico obtido através de recursos de concentração celular, como a centrifugação (10000 x G durante 10 mi- nutos ou 1000 x G durante 60 minutos). O emprego do Gram em sedimento é particu- larmente útil no contexto da investigação de quadros infecciosos graves em pessoas que fizeram uso prévio de antimicrobianos. A especificidade do Gram é elevada quando o material biológico é proveniente de local desprovido de microbiota habitual
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